Diagnóstico por laboratorio

En caso de sospecha de cromoblastomicosis el médico puede solicitar el análisis de muestras obtenidas de las lesiones. La muestra ideal por su fácil obtención son las escamas de los puntos necróticos negros donde se concentran las estructuras del hongo, también se puede tomar escamas o exudados, o en caso de no estar disponibles las muestras anteriores, puede procederse a la toma de biopsia. A partir del material patológico obtenido se procede a realizar los exámenes directos y los cultivos.

● Examen directo e histopatología (microscopía)

El examen directo con KOH es de gran utilidad por su fácil realización y alta sensibilidad. En él pueden observarse las células escleróticas de Medlar o células fumagoides, celulas de 4 a 10 µm agrupadas de color café y paredes gruesas con doble membrana, que hacen diagnóstico de enfermedad, mas no del agente responsable. Estas estructuras también son fácilmente identificables en los cortes histopatológicos teñidos con hematoxilina eosina y ácido peryódico de Shiff.

● Cultivo

El cultivo debe realizarse en agar sabouraud suplementado con antibióticos debido a que la muestra suele estar muy contaminada con bacterias, y en agar micosel, incubados a temperatura ambiente (25 – 28 °C) hasta por 4 semanas. Las colonias de todos los agentes responsables son difícilmente diferenciables por sus características macromorfológicas debido a que todos pueden producir colonias aterciopeladas o algodonosas densas de color oscuro (café, verde oscuro, grisáceo o negro). La esporulación observada al microscopio permite la identificación a nivel de género y especie.

Es común que estos agentes no esporulen en los medios de cultivo convencionales, por lo que se recomienda hacer su resiembra en medios de esporulación como agar PDA y agar corn meal. La esporulación permite la diferenciación de los agentes, sin embargo, en algunos casos es una tarea compleja por lo que se puede recurrir a las técnicas de biología molecular como la PCR empleando iniciadores específicos.

● Inmunodiagnóstico

En general, las pruebas inmunológicas no tienen importancia diagnóstica. Debido a que los antígenos tienen reacción cruzada con una variedad de hongos patógenos o con hongos contaminantes, las pruebas serológicas que detectan precipitinas y anticuerpos fijadores de complemento pierden relevancia.

● Pruebas moleculares

La identificación de las especies, de muestras biológicas y de cultivos, se hace mediante técnicas de PCR con cebadores específicos para cada especie, seguida por la secuenciación del fragmento amplificado.